色譜柱作為液相色譜系統(tǒng)的核心部件，其性能直接影響分離效果。針對(duì)峰形拖尾和柱壓飆升兩大常見(jiàn)故障，以下提供系統(tǒng)性解決方案：
峰形拖尾的根源與對(duì)策
篩板堵塞
當(dāng)色譜柱進(jìn)出口篩板被顆粒物或鹽結(jié)晶堵塞時(shí)，樣品流動(dòng)受阻導(dǎo)致延遲，形成拖尾峰。解決方案包括：
反沖色譜柱：使用甲醇或乙腈反向沖洗，逐步提高壓力至正常值。
更換篩板：若反沖無(wú)效，需拆卸色譜柱頭，用10%稀硝酸超聲清洗篩板10分鐘，再以純水超聲清洗后重裝。
預(yù)防措施：樣品需經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾，流動(dòng)相現(xiàn)用現(xiàn)配并脫氣，避免高鹽溶液在柱頭結(jié)晶。
色譜柱塌陷或污染
柱頭塌陷：長(zhǎng)期使用或流動(dòng)相pH超標(biāo)導(dǎo)致硅膠基質(zhì)溶解，入口端填料缺失。需更換色譜柱，并控制流動(dòng)相pH在2-9范圍內(nèi)。
固定相污染：復(fù)雜樣品中的強(qiáng)保留物質(zhì)（如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)）積累在柱頭，導(dǎo)致峰形展寬。可采用有機(jī)溶劑梯度洗脫1小時(shí)以上，或更換色譜柱。
樣品過(guò)載或溶劑不匹配
降低進(jìn)樣量至3-50μg，或提高檢測(cè)器靈敏度。
樣品溶劑極性應(yīng)與流動(dòng)相一致，避免反相色譜中使用高比例乙腈作為樣品溶劑。
柱壓飆升的根源與對(duì)策
物理堵塞
鹽結(jié)晶：高鹽緩沖液在關(guān)機(jī)時(shí)析出，堵塞柱頭。用10%甲醇/水沖洗溶解鹽結(jié)晶，再換高濃度有機(jī)相。
顆粒物污染：樣品或流動(dòng)相中的微粒堵塞篩板。需使用0.22μm濾膜過(guò)濾樣品，并安裝保護(hù)柱攔截污染物。
色譜柱損壞
填料塌陷：流速突變或高壓沖擊導(dǎo)致柱床壓實(shí)。需更換色譜柱，并避免流速驟變。
金屬污染：腐蝕性流動(dòng)相溶解柱頭金屬濾片，沉積金屬離子。可用堿洗/酸洗再生填料，或更換色譜柱。
操作不當(dāng)
保存不當(dāng)：色譜柱長(zhǎng)期閑置未保存于高比例有機(jī)相中，導(dǎo)致微生物滋生。需用乙腈-水-TFA（50:50:0.1）低流速過(guò)夜沖洗后密封保存。
溫度波動(dòng)：柱溫過(guò)低增加流動(dòng)相黏度，導(dǎo)致柱壓升高。使用柱溫箱控制溫度在40℃以下。
預(yù)防性維護(hù)建議
定期沖洗：每次分析后用甲醇沖洗色譜柱至基線平衡，避免鹽或強(qiáng)保留物質(zhì)殘留。
使用保護(hù)柱：在分析柱前安裝短保護(hù)柱，攔截污染物并延長(zhǎng)主柱壽命。
監(jiān)控柱壓：建立柱壓基線，若壓力升高超過(guò)10%需及時(shí)排查原因。
選擇合適填料：根據(jù)樣品性質(zhì)選擇耐酸堿、耐高壓的填料（如C18-SH或聚合物填料）。
通過(guò)系統(tǒng)排查篩板狀態(tài)、流動(dòng)相組成、樣品處理及操作規(guī)范，可顯著降低色譜柱故障率，延長(zhǎng)其使用壽命至2年以上。
